Некоторые фармакологические показатели нейротропного действия препарата натриевой соли никотиноил гамма-аминомасляной кислоты

УДК 615.214.31.03

Б.Ф.Дорофеев

Институт биохимии АН БССР, Гродно

 

Учитывая значительное содержание γ-аминомасляной кислоты (ГАМК) нервной ткани и ее роль как медиатора тормозного типа /1, 2/, а также самостоятельные нейротропные и транспортные свойства никотино­вой кислоты /3, 4/, основное внимание нами было обращено на влияние препарата на ЦНС. Как известно, ГАМК плохо проникает через гематоэнцефалический барьер /2/, поэтому ее конъюгация с никотиновой кис­лотой, осуществленная в синтезе пикамилона, позволяет рассчитывать на большую доступность препарата для нервной системы.

В связи с этим были исследованы острая токсичность пикамилона, его влияние на поведенческие реакции животных, изменение некоторых эффектов центральных анализаторов и некоторые биохимические показа­тели в мозге мышей. Для сравнения изучали ГАМК (аминалон, гаммалон).

Материалы и методы исследования

Опыты проводили на 210 белых мышах массой 18 - 21 г обоего по­ла, разбитых на группы по 8 - 10 животных в каждой. Изучаемые веще­ства назначали животным однократно в дозах 1/5, 1/Ю и 1/20 от ЛД 50 г/кг. Контрольные животные получали соответствующее количество растворителя. Спонтанную двигательную активность определяли контактным актометром /5/, ориентировочные реакции мышей регистрировали с по­мощью "открытой площадки" /6/, агрессивное поведение животных оцени­вали по методу Я.И. Зайдлер /7/, а температуру прямой кишки определя­ли электротермометром ТПЭМ-1. Влияние препаратов на гиперактивность мышей, стимулированную фенамином (5 мг/кг; п/к) и апоморфином (5 мг/кг; п/к), длительность латентного периода и продолжительность фенаминовой /8/ и апоморфиновой /9/ стереотипии, а также на измене­ние температуры животных, связанное с назначением фенамина (?|5 мг/кг; п/к) или аломорфина (20 мг/кг; п/к),изучали в условиях предварительного введения ГАМК и пикамилона за 30 мин до назначения анализаторов. Снотворное действие гексенала (60 мг/кг; п/к) и хлоралгидрата (300 мг/кг; п/к) оценивали по продолжительности «бокового положения». Судорожную активность коразола (80 мг/кг; п/к), ареколина (15 мг/кг; п/к), стрихнина (I мг/кг; п/к) и тиосемикарбазида (20 мг/кг; п/к) определяли по количеству смертельных исходов в контрольных и опытных группах.

Концентрацию ГАМК и глутаминовой кислоты в мозге мышей устанавливали методом хроматографии на бумаге /10/, активность декарбоксилазы (ГДК, КФ 4.1.1.15) и аминобутиратаминотрансферазы (ГАМК-Т, КФ 2.6.1.19) методами /11, 12/, ацетилхолинэстеразы (АХЭ) - методом Хестрина /13/ в модификации М.Д. Лемперта /14/ и моноаминооксидазы (МО) - методом А.И. Еалаклеевского /15/. Цифровой ма­териал обрабатывали по правилам вариационной статистики /16/.

Результаты и их обсуждение

Как показали опыты, ГАМК и ННГ оказались малотоксичными соединениями для мышей. Величина ЛД50 при внутрибрюшинном введении ГАМК составила 6,6 г/кг, а для ННГ - 5,0 г/кг (табл. I). Изучаемые соединения закономерно снижают показатели моторной активности мышей че­рез 30 и 60 мин. Степень снижения двигательной реакции находится в прямой зависимости от назначаемой дозы исследуемых веществ. Как вид­но из данных табл. 1, через 30 мин после назначения препаратов в дозе 1/10 от ЛД 50 ГАМК снижает спонтанную двигательную активность мышей в 4,5 раза, а ННГ в 10 раз по сравнению с контролем. Аналогич­ные результаты получены в опытах по исследованию влияния препаратов на ориентировочные реакции животных. В данных тестах по степени по­давления числа "заглядываний в отверстия" и количества подъемов на задние лапки подопытных животных активность двух исследуемых препа­ратов была примерно одинаковой. При изучении агрессивной реакции животных установлено, что латентный период драки под воздействием ГАМК увеличивался на 7,9 мин (контроль 1,8 ± 0,6 мин), а ННГ - на 8,9 мин. Количество эпизодов драки существенно не изменялось при введении обоих препаратов. Температура прямой кишки мышей через 30 мин после назначения ГАМК и ННГ падала соответственно на 1,3 и 2°С (р <0,05).

Исследуемые соединения, как свидетельствуют эксперименты, спо­собны изменять эффекты некоторых центральных анализаторов.

Наркотическое действие гексенала(60 мг/кг; и/к) и хлоралгидрата (300 мг/кг; и/к) под воздействием ГАМК и ННГ удлиняется соответст­венно в 3,1, 2,9 и 3,2, 6,2 раза по сравнению с контролем (11,8 ± 1,5 мин и 13,7 ± 2,0 мин). Судорожная активность коразола (80 мг/кг; п/к) ареколина (15 мг/кг; п/к) стрихнина (1 мг/кг; п/к) и тиосемикарбазида (20 мг/кг; п/к), оцениваемая по числу смертельных исходов в контрольных и опытных группах, не изменялась после предварительного введения исследуемых препаратов в дозе 1/10 от ЛД 50 г/кг.

Введение ГАМК и ННГ животным примерно одинаково подавляет гиперактивность мышей, моделируемую назначением фенамина и апоморфина. Фенаминовая гипертермия под влиянием ННГ возвращается к норме, а после назначения ГАМК температура прямой кишки падает ниже нормы. Оба препарата препятствуют (на 1,4 и 2,0°С) развитию апоморфиновой гипотермии.

Таблица 1

Сравнительная фармакологическая активность ГАМК и пикамилона

Показатель	Контроль	ГАМК	Пикамилон
Величина ЛД 50 г/кг		6,61(6,35 : 6,87)	5,0(4,58 : 5,45)
Спонтанная двигательная активность, % к фону	100,0 ± 23,1	22,1 ± 12,7*	9,9 ± 3,9*
Ориентировочные реакции, % к фону:
число заглядываний в отверстия	100 ± 8,2	27,9 ± 6,8*	32,2 ± 9,2*
количество подъемов на задние лапки	100,0 ± 14,5	18,4 ± 11,8*	13,6 ± 7,4*
Агрессивное поведение:
латентный период драки, с	1,8 ± 0,6	9,7 ± 11*	10,7 ± 1,1*
количество эпизодов драки, за 20 с	7,7 ± 1,7	5,7 ± 1,6*	6,3 ± 1,4*
температура прямой кишки, 0С	38,2 ± 0,2	36,9 ± 0,03*	36,2 ± 0,02*
Эффекты фенамина:
гиперактивность, % к фону	211,0 ± 21,6	115,8 ± 25,6*	133,4 ± 25,0*
гипертермия, 0С	38,8 ± 0,2	35,2 ± 0,7*	37,6 ± 0,6*
стереотипия, мин	92,0 ± 8,0	150,0 ± 12,0*	71,0 ± 6,0*
Эффекты апоморфина:
гиперактивность, % к фону	243,6 ± 24,0	133,4 ± 31,0*	131,0 ± 32,0*
гипертермия, 0С	31,6 ± 0,5	33,0 ± 0,4*	33,6 ± 0,3*
стереотипия, мин	64,3 ± 1,8	46,2 ± 2,2*	39,2 ± 5,3*

*р <0,05

 

ГАМК и ННГ сокращает в равной мере продолжительность латентно­го периода стереотипии у крыс (на 31%) по сравнению с контролем (52 мин). Однако продолжительность стереотипии под воздействием ГАМК увеличивается в 1,6 раза, а ННГ, наоборот, падает на 21 мин по сравнению с контролем. Длительность апоморфиновой стереотипии после назначения ГАМК и ННГ сокращается соответственно на 29,7 и 25,2% по сравнению с контролем (р < 0,05).

Проведенные биохимические исследования показали, что уровень ГАМК и глутаминовой кислоты (ГК) в мозге мышей спустя 1 ч после внутрибрюшинного введения ГАМК и ННГ (1/10 от JIД 50 г/кг) оставался в пределах значений для здоровых животных (табл. 2). Активность ГДК в этот период наблюдения оказалась сниженной после назначения обоих препаратов, а ГАМК-Т - находилась в пределах контрольных величин. Активность АХЭ снижалась только после введения ННГ (на 16,35%) в сравнении с контролем. Влияние препаратов на ключевой фермент адренергической системы - МАО было противоположным. Если назначение ГАМК повышало аа активность в мозге мышей, то ННГ - уменьшало.

Таблица 2

Биохимические показатели в мозге мышей через 1 ч после введения ГАМК и пикамилона (1/10 JIД 50 г/кг; в/б)

Показатель	Контроль	ГАМК	Пикамилон
ГАМК, мг %	21,5 ± 0,8	22,3 ± 1,0	22,0 ± 1,4
ГК, мг %	77,9 ± 3,7	73,6 ± 4,3	81,0 ± 4,4
ГДК, мкМ/ГАМК/г ч	9,6 ± 0,6	6,7 ± 0,6*	7,3 ± 0,5*
ГАМК-Т, мкМ/ГК/г ч	47,9 ± 3,6	54,7 ± 2,5	54,2 ± 1,0
АХЭ, мкг/АХ/г ч	44,2 ± 1,3	43,8 ± 0,6	37,0 ± 1,4*
МАО, усл.ед / г ч	66,2 ± 2,5	73,7 ± 2,8	57,7 ± 2,4*

*р <0,05

 

Таким образом, ГАМК и пикамилон обладают выраженными нейротропными свойствами. Причем пикамилон обладает своим спектром фармако­логического действия, иногда его нейротропные эффекты противоположны изучаемому медиатору торможения. Хотя ННГ и не оказывает выражен­ного влияния на систему ГАМК в мозге мышей (о чем свидетельствуют данные биохимических исследований), однако снижение активности ГДК, особенно при длительном назначении препарата, может привести к на­рушениям обмена медиатора в мозге животных. Препарат влияет на холинергические, и особенно отчетливо на адренергические, процессы в моз­ге мышей. Об этом свидетельствуют опыты совместного назначения жи­вотным ННГ с фенамином и апоморфином (см. табл. 1), а также способность препарата угнетать активность МАО в мозге животных.

Список литературы

1. Сафаров М.И., Сытинский И. А. Гамма-аминомасляная кислота в развивающемся мозге. - Баку, 1980, - 181 с.

2. Сытинский И. А. Гамма-аминомасляная кислота в деятельности нервной системы. - Л,: Наука, 1972. - 200 с.

3. Виноградов В.В. Некоферментные функции витамина РР - Минск: Наука и техника, 1987. - 200 с

4. Экспериментальная витаминология/Под ред. Ю.М.Островского. - Минск: Наука и техника, 1979. - С. 411 - 437.

5. Балткайс Я.Я.// Бюл. экспер. биол. и мед. - 1965. - № 12. - С. 106 - 107.

6. Балынина Е.С., Березовская И.В.//Фармакол. и токсикол.-1976.- № 5.-С. 635 - 638.

7. Зайдлер Я. И.// Фармакол. и токсикол. - I960. - № 3.- С. 272 - 273.

8. Щелкунов Е, Л.// Фармакол. и токсикол. - 1964. -№5. - С. 628 - 633.

9. Ме nge H. G., Вг aud U.//Psychopharmacologia. -1971. - Vol. 21. - P. 212 - 228.

10. Пасхина Т. С. Современные методы в биохимии. – М.: 1964. - С. 162 - 180.

11. Острецова И.Б., Сытинский И.А.// Укр. биохим. журн.-1962.-№3 - С. 456 - 474.

12. Roberts E., Bregoff H.//J.Biol.Chem. - 1953.- Vol. 201. - P. 393 - 398.

13. Hestrin S.//J.Biol.Chem. - 1949. - Vol. 180. -P. 249 - 250.

14. Лемперт М.Д. Биотехнологические методы исследо­вания. - Кишинев, 1968. - С. 205 - 208.

15. Балаклеевский А. И.// Лаб.дело. - 1976. -№ 3, - с. 151 - 153.

16. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки Фармакологического эффекта. - Л.: 1963. - 151 с.